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PG和PG-Dox偶聯物溶解在在pH7.4的PBS緩沖液中，通過OMINISEC進行樣品的分離和檢測。OMNISEC是一個多檢測器SEC系統，包括示差檢測器(RI)、紫外檢測器(UV)、光散射檢測器(LS)和粘度檢測器(IV)。流動相為PBS pH 7.4，含30%(v/v)甲醇水溶液；采用馬爾文A6000M和A3000色譜柱分離。

測試PG樣品和兩個PG-Dox偶聯物樣品色譜圖如圖1所示，PG的數值結果見表1。PG樣品分離顯示一個單峰，測得其平均分子量(MW)約為13KDa。再看兩個偶聯樣品，都分離出和PG具有相似保留體積的多峰。較早洗脫的光散射色譜圖(綠色，12-14mL)表明存在一些大的聚集體。而且，這些峰包含明顯的紫外吸收信號，表明Dox的存在成功地偶聯到聚合物上。

在圖2 A中可以看到，在不同進樣量下檢測游離Dox的UV色譜圖，可以看到游離的Dox從柱上洗脫得很晚，實際上已經在整個柱體積之后。這清楚地表明了Dox與色譜柱發生了顯著的相互作用，延遲了Dox的洗脫。但從圖2 B所示濃度響應曲線可以看出，盡管存在相互作用，回收率仍然接近100%。該校準曲線用來測量存在于PG-Dox樣品中的Dox的量。

如果我們確定36mL處的峰為游離Dox，這樣PG-Dox樣品中的相同位置峰也能確定為游離Dox。如圖3所示，可以清楚地確定偶聯樣品含有PG-Dox偶聯物和游離Dox。

使用圖2 B中的濃度校準曲線，可以計算偶聯樣品中存在的Dox量。如表2所示，兩種PG-Dox偶聯物都含有游離的Dox。在一次注射體積中，PG-Dox 1的偶聯物中含有大約11μg的Dox，而PG-Dox 2的偶聯物中含有大約39μg的Dox。然后，可以計算出樣品中注入的總Dox質量和Dox濃度。然后，可以根據溶解物質的質量計算出近似的總樣品濃度。這樣就可以計算每個PG-Dox偶聯物中Dox的近似負載量。由此可以近似地看出，樣品2的偶聯物中含有的Dox是樣品1的三倍。

我們可以對PG-Dox偶聯物進一步表征（其中dn/dc假設分析），計算偶聯聚合物的近似分子量、特性粘度和結構數據，如表3所示。

Mark-Houwink(M-H圖)顯示了特性粘度作為分子量的函數，是分子間結構差異的直觀表示。在溶液中密度較高的聚合物在M-H圖上看起來較低，用來研究結構變化，如支化、偶聯等結構變化。圖4顯示了3個樣本的M-H圖。首先，這兩個PG-Dox偶聯物M-H曲線顯著低于單獨的PG。這是我們預料中的，因為藥物分子的偶聯將增加聚合物在溶液中的表觀密度，并且具有更大Dox負載量的樣品將進一步向下移動。PG-Dox 1和PG-Dox 2之間的斜率不同，說明Dox負載量可能不是隨分子量均勻分布的。