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隨著多參數流式細胞術（multi-parameterflowcytometry,MFC）的發展和完善，免疫細胞的精細化分型將在臨床實踐中發揮越來越重要的作用，在多個領域取得了顯著進展，不僅提升疾病的診斷準確性，還能夠指導治療決策，改善患者預后。

MFC精細化分型的臨床應用

MFC通過增加更多參數進行精細化分析，能夠提供更加全面、立體的免疫細胞信息，具有重要的臨床價值，主要包括以下幾個方面：

疾病篩查與診斷

● 精細化分型有助于早期識別淋巴瘤及腫瘤前驅病變，包括癌前病變和癌前狀態。

● 對于遺傳性和免疫缺陷性疾病的診斷也提供了更為準確的基礎。

疾病進程監測

● 精細化分析可以揭示良性和惡性疾病的發生、發展過程及其預后情況，與免疫細胞亞群的變化密切相關。

● 提供了動態監測疾病變化的能力，特別是在治療前后對比個體的基礎值時尤為重要。

特殊治療后的免疫重建評估

● 在免疫治療和造血干細胞移植等特殊治療后，偏離規律性的免疫細胞亞群變化可能預示著疾病預后和并發癥的風險。

● 精細分型能夠幫助醫生更好地理解患者的免疫恢復狀況，優化后續治療策略。

個性化醫療支持

● 通過精細化分型獲得的詳細信息，可以為每位患者制定個性化的治療方案，提高治療的有效性和針對性。

● 有助于建立更精確的個體化健康檔案，跟蹤長期健康趨勢。

共識建議的免疫細胞精細化分型方案

在《中華預防醫學》2023年11月第57卷第11期發表的《基于多參數流式細胞術精細化分析外周血免疫細胞亞群的中國專家共識》中建議的適用于貝克曼庫爾特公司的流式細胞分析檢測技術平臺的精細化免疫細胞亞群8色方案如下，其他平臺可根據這個方案適當調整。

Treg：調節性T細胞；DC：樹突狀細胞；TCR：T細胞受體；TCRVδ：T細胞受體δ鏈可變區；Th：輔助性T細胞；TRBC1：Ｔ細胞受體β鏈恒定結構域。FITC為異硫氰酸熒光素，PE為藻紅蛋白，PE-Cy5.5為藻紅蛋白偶聯物，PE-CY7為藻紅蛋白偶聯物，APC為別藻青蛋白，APC-A750為別藻青蛋白偶聯物，PB為太平洋藍，KrO為科洛姆橙。

共識中方案的應用，解讀文章如下：

免疫細胞精細分型重磅共識發布！世界免疫日，解碼“免疫力”！

精細化分型參考范圍

近日，《中華檢驗醫學雜志》2024年12月第47卷第12期發表的《多參數流式細胞術精細化免疫細胞亞群參考區間的建立》的文章中，根據這一共識中的方案，完成了326名表觀健康人免疫細胞亞群參考區間的制作，按照年齡分為18~40歲和41~60歲組，報告內容包括了T細胞、B細胞、NK細胞、單核細胞及DC細胞等不同類型的精細化亞群。

接下來我們一起來看一下具體的參考區間。

T淋巴細胞亞群參考區間范圍

覆蓋了常規T淋巴細胞亞群的大部分檢測項目，分為按照表型分類、按分化狀態分類、按活化及功能分類等幾大類型的細胞亞群的相對計數和絕對計數參考區間。

初始T細胞在老年人中的比例明顯下降，CD28的表達也出現顯著降低，而在終末分化的記憶性T細胞中的CD57表達則出現增高。本研究中，與18~40歲組相比，41~60歲組人群CD4+初始T細胞和CD4+中心記憶T細胞等一些衰老相關亞群均出現了顯著變化。

NK、DC、單核細胞及B細胞精細亞群

參考區間

包括B細胞亞群、NK細胞亞群、單核細胞亞群和DC細胞亞群中常用的檢測群體的參考區間。文章研究得出，41-60歲組的成熟的NK亞群CD3?CD56lowCD16+更高，而在18-40歲組中未成熟的NK亞群CD3?CD56hiCD16?更高。DC細胞包括pDC和mDC亞群，pDC占DC細胞比例參考區間為5.0%~38.1%，41~60歲組比18~40歲組的pDC占比更低。

這套通過多參數流式細胞的方法建立了T、B、NK、單核、DC等免疫細胞精細亞群的參考區間，為日常工作開展精細分型的檢測提供了參考依據。大家在實際的開展中仍需注意不同儀器和試劑熒光素不同對結果的影響、實驗室驗證時應充分考慮年齡因素、注意與臨床疾病應用的結合。

參考文獻：

1.中國中西醫結合學會檢驗醫學專業委員會. 基于多參數流式細胞術精細化分析外周血免疫細胞亞群的中國專家共識[J]. 中華預防醫學雜志, 2023,57(11):1729-1747. 

2．谷春,王斐,李楠楠,等. 多參數流式細胞術精細化免疫細胞亞群參考區間的建立[J]. 中華檢驗醫學雜志,2024,47(12)：1411-1418.