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Afla M1試驗方法
快速——一次試驗只需不到15分鐘(不包括樣品制備)。
靈敏——檢測限可至10ppt。
回收率高——回收率為75%—95%。
操作簡單——不需特殊的訓練,在任何地方都可以完整地進行試驗。
安全——與普通方法相比,所用的材料基本無毒性。
黃曲霉毒素M1是存在于牛奶中的一種毒素,從已攝入的黃曲霉毒素衍生而成。黃曲霉毒素已經被證明是一類致癌物,對人體容易產生癌癥。黃曲霉毒素M1的檢測十分嚴格,因為它存在于嬰兒、兒童、成人每天食用的牛奶中。世界各國對奶制品中黃曲霉毒素M1的含量都有嚴格的的規定。VICAM研制開發的Afla M1是一種流動很快的親合柱,視樣品的種類不同,其回收率為75%至95%。
VICAM公司的Afla M1是一種快速的黃曲霉毒素試驗方法,能夠產生準確定量的試驗結果。Afla M1試驗方法應用了單克隆親合色譜法,能夠將黃曲霉毒素M1從奶制品中分離出來。
Afla M1試驗方法既安全又簡單,不需要特殊的技能。這種方法可以真正稱得上靈敏、簡單、快速,是檢測ppb、ppt級黃曲霉毒素M1的快速試驗方法。Afla M1也是HPLC分析方法*理想的凈化步驟。
另外,Afla M1還具有很長的保存時間(1年)。Afla M1試驗方法快速、準確、經濟,事實上,全世界沒有另外一種方法可以與之相媲美。
Afla M1試驗方法操作步驟簡介:
1. 樣品制備
稱量樣品。
離心分離。
2. 吸附、淋洗
將樣品通過Afla M1親合柱。
用水清洗Afla M1親合柱。
用乙腈甲醇將黃曲霉毒素從親合柱上淋洗下來,并收集于試管中。
3. 測定
將淋洗液注入HPLC中。
用HPLC測定黃曲霉毒素M1的濃度。
訂貨指南
C/N G1007 Afla M1 親合柱 (25個/包)。
C/N G1106 Afla M1泵流工作臺(包括泵和注射器管)。
C/N 34000 試管(250個/包)。
C/N 21000 試管架。
C/N 20700 洗瓶(500ml)。
維康4EX系列黃曲霉毒素M1分析系統是美國Vicam維康公司的**技術產品,采用免疫親和柱凈化分離,熒光計定量檢測。2003年2月21日被國家標委會正式批準了國標方法“乳和乳粉中黃曲霉毒素M1的測定-免疫親和層析凈化高效液相色譜法和熒光光度法” (GBT18980-2003),2010年3月26日又被衛生部批準為“食品安全國家標準 乳和乳制品中黃曲霉毒素M1的測定”(GB 5413.37-2010)。
以前,黃曲霉毒素M1分析系統一般采用薄層色譜法(TLC)、高效液相色譜法(HPLC)和酶聯吸附免疫法(ELISA)。TLC雖然簡便,但靈敏度差;HPLC雖然靈敏度高,但樣品處理煩瑣,操作復雜,儀器昂貴。ELISA重復性差、試劑壽命短需要低溫保存。此外,這些方法都具有如下共同的不足之處:(1)在操作過程中,需要使用劇毒的真菌毒素作為標定標準物,對操作人員造成巨大的沾污危險。(2)在對樣品進行預處理過程中,需要使用多種有毒、異味的有機溶劑,不僅毒害操作人員,而且污染環境。(3)操作過程煩瑣、時間長,勞動強度大。(4)儀器設備復雜、笨重,難以實現現場快速分析。(5)靈敏度較差,無法滿足歐盟等國的標準要求。
為了開發一種簡單、快速、靈敏、準確的分析方法,美國VICAM(維康)公司與哈佛大學、麻省理工學院、約瀚-霍普金斯大學、AOAC、FDA、FGIS、美國農業部等**大學和政府機構通力合作,發明研制了一系列的以單克隆免疫親合柱為分離手段,用熒光計、紫外燈作為檢測工具的分析方法。維康技術具有如下特點 :(1)是AOAC(美國職業分析家協會)、IUPAC(國際純粹與應用化學協會)、USDA-FGIS(美國農業部聯邦谷物檢測中心)、USDA-GIPSA(美國農業部谷物檢測、包裝、貯存行政署)認證的官方方法,其檢測結果在世界各地均能得以認可。(2)分析速度快,一個樣品只需10-15分鐘,而其它傳統方法均需要幾個小時至幾天時間。(3)靈敏度高,測定范圍寬(0.1-300ppb),用熒光計法檢測可以測定0.025ppb的黃曲霉毒素M1,用HPLC檢測可以測定10ppt的黃曲霉毒素M1。而中國和國際對黃曲霉毒素M1的限量要求是0.5ppb。(4)采用單克隆抗體免疫技術,可以特效性地將黃曲霉毒素M1或其它真菌毒素分離出來,分離效率和回收率高,正確性和可靠性強。(5)儀器設備輕便容易攜帶,自動化程度高,操作簡單,直接讀出測試結果,高中文化水平者即可勝任,可以在小型實驗室或現場使用。(6)不需要劇毒的黃曲霉毒素M1及其它真菌毒素標準物來標定,所以整個試驗操作過程中,**安全可靠。(7)利用同一臺儀器和相似的分析方法,還可以檢測黃曲霉毒素總量、黃曲霉毒素B1、赭曲霉毒素A、伏馬毒素、玉米赤霉烯酮、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(DON或稱嘔吐毒素)和T-2毒素。(8)在2002年由國家認證認可監督管理委員會實驗室部負責組織的黃曲霉毒素能力測試中,全部達到滿意和合格。
目前,中國采用維康技術分析黃曲霉毒素M1的用戶包括:檢驗檢疫系統(廣東、珠海、中山、山東、煙臺、濰坊、威海、榮成、臨沂、日照、天津、遼寧、沈陽、葫蘆島、錦州、北京、上海、廈門、湖北、重慶、四川、河北、內蒙古、包頭、二連、黑龍江、齊齊哈爾),質檢系統(上海、北京、杭州、濰坊、淄博、壽光、肥城、大連、山西、哈爾濱、西安),北京CDC、陜西CDC、延安CDC、江西藥食檢、上海食藥所、天津農科院、新疆農科院、四川農科院、河南農科院、上海光明(農業部乳品檢測中心)、黑龍江完達山(農業部乳品檢測中心)、山東華盛食品、天津雀巢、廣東美贊誠、上海味好美、深圳南山衛生防疫站等。檢測黃曲霉毒素總量和B1的用戶還有300多家。可以檢測的樣品包括:牛奶、奶粉、奶制品、大米、面粉、醬油、植物油、醋、花生、花生醬、花生油、核桃、胡桃、杏仁、咖啡、玉米、蜂蜜、谷物、高粱、大豆、醬、蔬菜、胡椒、辣椒、中藥材、煙草、啤酒、小麥、棉籽、燕麥、飼料等。
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