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面議
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LSM是世界上**臺(tái)真正意義上的高通量全自動(dòng)斑馬魚顯微操作注射儀,它的誕生完全可以滿足對(duì)于高通量胚胎或細(xì)胞的注射需求和解放實(shí)驗(yàn)操作人員的雙手,讓顯微注射變得更加簡單,快速,精準(zhǔn)!
高通量全自動(dòng)斑馬魚胚胎顯微注射與傳統(tǒng)技術(shù)相比優(yōu)勢(shì):
1. 高通量,2500個(gè)胚胎/小時(shí),全自動(dòng)無需手工注射
2. 可定量的注射,重復(fù)性高,方便對(duì)比研究
3. 快速檢測通常需要3 - 7天,而不是使用其他技術(shù)的數(shù)周時(shí)間
4. 精確全自動(dòng)3D定位,方便快速,可以實(shí)現(xiàn)高效的自動(dòng)成像(兼容共聚焦顯微鏡等)
5. 可培養(yǎng)細(xì)胞3D球狀,使用細(xì)胞系或原細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)
6. 可進(jìn)行腫瘤微環(huán)境研究;球狀體可以在預(yù)先形成的微晶中引入環(huán)境,如與膠原凝膠混合的細(xì)胞
7. 可細(xì)胞間相互作用的研究,如癌癥和免疫細(xì)胞,細(xì)菌和免疫細(xì)胞
斑馬魚胚胎顯微注射應(yīng)用領(lǐng)域:
1. 高通量斑馬魚胚胎注射:將瓊脂糖凝膠注入模具形成一個(gè)瓊脂網(wǎng)格,該網(wǎng)格用于將斑馬魚的胚胎對(duì)齊。注射時(shí),根據(jù)實(shí)驗(yàn)所需樣品批量不同,可以選擇不同規(guī)格的網(wǎng)格,如: 2580 個(gè), 1024 個(gè), 9 x 100 個(gè)。 將胚胎放入模具中只需要不到5分鐘的時(shí)間。我們的機(jī)器可以在*接近受精卵和卵黃表面處進(jìn)行注射,從而保證了注射的質(zhì)量。
2. 3D細(xì)胞培養(yǎng),細(xì)胞球類:首先,膠原蛋白,或另一種水凝膠,被吸進(jìn)一個(gè)多孔板,并被允許設(shè)置。然后,從細(xì)胞培養(yǎng)或初級(jí)組織中制備出一種單細(xì)胞懸浮體。這種細(xì)胞懸浮體與一種惰性聚合物,PVP混合在一起,并被裝入針頭。*后,細(xì)胞懸浮在預(yù)先確定的位置被注入到水凝膠中。一種典型的檢測方法是培養(yǎng)3-7天,可以使用標(biāo)準(zhǔn)/共焦顯微鏡進(jìn)行病理處理,或?yàn)榱魇郊?xì)胞多色分析制樣。可復(fù)制的注入位置允許對(duì)相同的位置的所有孔進(jìn)行成像。球體的大小(~300μ,~10k的細(xì)胞)和外生長是可復(fù)制的,從而成為活性篩查遷移、增殖等的立項(xiàng)選擇。
3. 細(xì)胞注射:注射是在精確的位置進(jìn)行的,因此不同的細(xì)胞類型可以被注射到可復(fù)制的距離上。這些注射可以在不同的時(shí)間進(jìn)行,以適應(yīng)不同的生長速度或時(shí)間依賴的生物相互作用。許多混合培養(yǎng)分析正在發(fā)展中。
斑馬魚胚胎顯微注射文獻(xiàn)鏈接:
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Meijer, A. H., Spaink, H. P. Host-pathogen interactions made transparent with the zebrafish model.Curr Drug Targets. 12, 1000-1017
Pardo-Martin, C., et al. High-throughput in vivo vertebrate screening. Nature Methods. 7, 634-636
Stoop, E. J. M., et al. Zebrafish embryo screen for mycobacterial genes involved in the initiation of granuloma formation reveals a newly identified ESX-1 component. Disease Model., & Mechanisms. 4, 526-536
Benard, E. L., et al. Infection of zebrafish embryos with intracellular bacterial pathogens. J Vis Exp.