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全自動(dòng)外泌體熒光檢測(cè)分析系統(tǒng)

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量子科學(xué)儀器貿(mào)易(北京)有限公司

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全自動(dòng)外泌體熒光檢測(cè)分析系統(tǒng)

美國(guó)NanoView公司所開(kāi)發(fā)的全自動(dòng)外泌體熒光檢測(cè)分析系統(tǒng)是一款無(wú)需純化的、全自動(dòng)的可對(duì)單個(gè)外泌體進(jìn)行表征分析的全新設(shè)備。該設(shè)備能夠提供全方位的外泌體表征信息,包括外泌體粒徑大小、計(jì)數(shù)、分布、攜帶蛋白表達(dá)、生物標(biāo)志物(CD9,CD81,CD63等)共定位等。操作簡(jiǎn)單,結(jié)果可靠。一經(jīng)推出,便引起了外泌體領(lǐng)域科研工作者的廣泛關(guān)注,短短兩年時(shí)間在全球已有50多個(gè)實(shí)驗(yàn)室采用該技術(shù),發(fā)表重要文獻(xiàn)近百篇。

全自動(dòng)外泌體熒光檢測(cè)分析系統(tǒng)的基本原理是一種基于特異性免疫捕獲技術(shù),允許研究者直接分析特定群體的外泌體或外囊泡。通過(guò)配套的試劑盒,客戶一次性能夠分析多達(dá)9個(gè)不同的樣本,大大節(jié)省了時(shí)間和經(jīng)濟(jì)成本。全自動(dòng)外泌體熒光檢測(cè)分析系統(tǒng)兼容各種生物樣本,除了純化的外泌體之外,對(duì)于血液、尿液、惡性腫瘤、腹水中的外泌體也可直接檢測(cè)分析,大大拓展了研究范圍。

應(yīng)用方向及主要特征

生物標(biāo)記物共定位

可量化4種標(biāo)記物的表達(dá)情況

計(jì)數(shù)分析

直接從樣品中計(jì)算抗原陽(yáng)性外泌體的數(shù)量,無(wú)需提純

粒徑分析

高精度統(tǒng)計(jì)外泌體的顆粒大小及分布

檢測(cè)外泌體內(nèi)容物

使用ExoView Cargo試劑盒可探測(cè)外泌體內(nèi)部核酸的裝載情況,分析裝載率

熒光檢測(cè)

具備3個(gè)熒光通道,能夠探測(cè)單個(gè)蛋白的結(jié)合

線性工作流程

9個(gè)樣品的全自動(dòng)分析

無(wú)須純化

無(wú)需擔(dān)心純化帶來(lái)的誤差,更精確的測(cè)量樣品間的表征和表達(dá)信息的差異

多重樣本分析

可使用6種表面標(biāo)記物來(lái)篩選外泌體

粒徑分析

全自動(dòng)外泌體熒光檢測(cè)分析系統(tǒng)能夠?qū)?50 nm的外泌體進(jìn)行全方面的表征,無(wú)論是粒徑尺寸、粒徑分布還是外泌體的亞型均可在一次測(cè)試中得到。并且所用來(lái)測(cè)試的樣本無(wú)需進(jìn)行純化,避免因純化帶來(lái)的樣本偏差。

分析不同大小和不同尺度的外泌體亞群,在CD171過(guò)表達(dá)系統(tǒng)中,100 nm以上的外泌體僅表達(dá)了CD171。

量化外泌體亞群

通過(guò)抗體捕獲的模式,全自動(dòng)外泌體熒光檢測(cè)分析系統(tǒng)能夠量化含有不同標(biāo)記物的外泌體亞群,并對(duì)不同種群的外泌體進(jìn)行特異性計(jì)數(shù)和分析。整個(gè)過(guò)程無(wú)需純化,并且線性范圍可跨越3個(gè)數(shù)量級(jí)。

TSPAN8陽(yáng)性細(xì)胞外囊泡的稀釋曲線。使用1:3比例的梯度稀釋。用R2 = 0.9986計(jì)算與TSPAN8熒光數(shù)據(jù)的線性擬合。

檢測(cè)外囊泡中的裝載物

MISEV建議在表征外泌體和外囊泡時(shí),應(yīng)當(dāng)同時(shí)測(cè)量表面和載體蛋白。使用ExoView芯片可穿透外泌體,探測(cè)膜內(nèi)蛋白和載體。并且單次可定量3種表面、管腔蛋白。

檢測(cè)細(xì)胞外泌體內(nèi)的Syntenin。

WT細(xì)胞在未穿膜的條件下幾乎觀測(cè)不到Syntenin的信號(hào)。進(jìn)行穿膜處理后可以觀測(cè)到Syntenin信號(hào),而KO之后信號(hào)消失

生物標(biāo)志物共定位

全自動(dòng)外泌體熒光檢測(cè)分析系統(tǒng)能夠在單個(gè)外泌體樣本上檢測(cè)多達(dá)4種標(biāo)記物,并同時(shí)提供外泌體的其它表征數(shù)據(jù)諸如計(jì)數(shù)、顆粒尺寸統(tǒng)計(jì)等。

無(wú)需純化

全自動(dòng)外泌體熒光檢測(cè)分析系統(tǒng)只測(cè)量含有靶標(biāo)抗原的特定細(xì)胞外泌體群體。僅需35ul的稀釋樣品,即可直接獲得外泌體的表型、l粒徑和計(jì)數(shù)信息。并且無(wú)需擔(dān)心污染物對(duì)測(cè)試的影響。

無(wú)論純化與否,Exoview均可進(jìn)行分析

ExoView™ Kit 配置清單:

ExoView™

Tetraspanin Kits

CD9 - 捕獲抗

CD63 - 捕獲抗體

CD81 - 捕獲抗體

Mouse IgG 陰性對(duì)照

CD9、CD63、CD81三色共標(biāo)記熒光抗體。

ExoView™

Tetraspanin Plasma Kits

CD9 - 捕獲抗體

CD63 - 捕獲抗體

CD81 - 捕獲抗體

CD41a - 捕獲抗體

多達(dá)三種定制化捕獲抗體

同種陰性對(duì)照

CD9、CD63、CD81三色共標(biāo)記熒光抗體。

ExoView™

Tetraspanin Custom Kits

CD9 - 捕獲抗體

CD63 - 捕獲抗體

CD81 - 捕獲抗體

多達(dá)三種定制化捕獲抗體

同種陰性對(duì)照

CD9、CD63、CD81三色共標(biāo)記熒光抗體。

ExoView™

Cargo Kits

兼容所有ExoView Kit

標(biāo)準(zhǔn) CD9, CD63和CD81 捕獲抗體

Mouse IgG 陰性對(duì)照

ExoView Cargo 試劑

CD9、CD63、CD81三色共標(biāo)記熒光抗體。

Sytenin熒光抗體

發(fā)表文章

2020年已發(fā)表文獻(xiàn)

1. Cytokine profiling in serum-derived exosomes isolated by different methods, Jung HH, Kim JY, Lim JE, Im YH, Nature Scientific Reports 2020

2. Study of immune-tolerized cell lines and extracellular vesicles inductive environment promoting continuous expression and secretion of HLA-G from semiallograft immune tolerance during pregnancy, Cho K, Kook H, Kang S Lee J, JEV 2020

3. Annexin A1–dependent tethering promotes extracellular vesicle aggregation revealed with single–extracellular vesicle analysis, Rogers MA, Buffolo F, Schlotter F, Atkins SK, Lee LH, Halu A, Blaser MC, Tsolaki E Higashi H, Luther K, Daaboul G, Bouten CVC, Body SC, Singh SA, Bertazzo S, Libby P, Aikawa M, Aikawa E, Cell Biology 2020

4. Targeting tumor-derived exosomes using a lectin affinity hemofiltration device, Marleau AM, Jacobs MT, Gruber N, Rodell TC, Ferrone S, Whiteside TL, Cancer Research2020

5. Extracellular Vesicle and Particle Biomarkers DefineMultiple Human Cancers. Hoshino A, Kim HS, Bojmar L, Gyan KE, Cioffi M, Hernandez J, Zambirinis CP, Rodriques G, Molina H, Heissel S, Mark MT, Steiner L, Benito Martin A, Lucotti S, Di Giannatale A, Offer K, Nakajima M, Williams C, Lyden D., Cell 2020

6. Reporter mice for isolating and auditing cell type‐specific extracellular vesicles in vivo, McCann JV, Bischoff SR, Zhang Y, Cowley DO, Sanchez-Gonzalez V, Daaboul GG, Dudley AC, Genesis2020

7. High yield and scalable EV production from suspension cells triggered by turbulence in a bioreactor, Grainger A, Wilhelm C, Gazeuah F, Silva A, Cytotherapy 2020

8. Extracellular Vesicles: A New Frontier for Research in Acute Respiratory Distress Syndrome, Mahida RY, Matsumoto S, Matthay MA. American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology2020

9. Small extracellular vesicles modulated by αVβ3 integrin induce neuroendocrine differentiation in recipient cancer cells, Quaglia F, Krishn SR, Daaboul GG, Sarker S, Pippa R, Domingo-Domenech J, Kumar G, Fortina P, McCue P, Kelly WK, Beltran H, Liu Q, Languino LR., Journal of Extracellular Vesicles, Volume 9, Issue 1, 2020

10. Characterisation of extracellular vesicles surface markers and co-expression studies with single particle interferometric imaging platform, Kusuma G, Lim R., Cytotherapy, Volume 22, Issue 5, 2020

11. Engineering mesenchymal stem cell paracrine activity with 3D culture, Kusuma G, LiA, Zhu D, McDonald H, Chmabers D, Frith J, Lim R.Cytotherapy, Volume 22, Issue 5, 2020

12. Release of extracellular vesicle miR-494-3p by ARPE-19 cells with impaired mitochondria,Ahn JY, Datta S, Cano M, Mallick E, Rai U, Powell B, Tian J, Witwer KW, Handa JT, Paulaitis ME.,Biochim Biophys Acta Gen Subj. 2020 Mar 30:129598. (doi: 10.1016/j.bbagen.2020.129598)

13. Advantageous Antibody Microarray Fabrication Through DNA-Directed Immobilization: A Step Toward Use of Extracellular Vesicles in Diagnostics, Brambila D, Sola L, Chiari M., Talanta 2020

15. Membrane-Binding Peptides for Extracellular Vesicles On-Chip Analysis, Gori A, Romanato A, Bergamaschi G, Strada A, Gagni P, Frigerio R, Brambilla D, Vago R, Galbiati S, PIcciolini S, Bedoni M, Daaboul G, Chiari M, Cretich M., Journal of Extracellular VesiclesVolume 9, Issue 1, 2020

16. Subpopulations of extracellular vesicles from human metastatic melanoma tissue identified by quantitative proteomics after optimized isolation, Crescitelli R, L?sser C, Jang SC, Cvjetkovic A, Malmh?ll C, Karimi N, H??g JL, Johansson I, Fuchs J, Thorsell A, Gho YS, Bagge RO, L?tvall J, Journal of Extracellular Vesicles, 2020

17. Extracellular Vesicles Derived from Induced Pluripotent Stem Cells Promote Renoprotection in Acute Kidney Injury Model, Collino F, Lopes JA, Tapparo M, Tortelote GG, Kasai-Brunswick TH, Lopes GMC, Almeida DB, Skovronova R, Wendt CHC, de Miranda K, Bussolati B, Vieyra A, Soares Lindoso R., Cells, 2020

18. Extracellular Vesicles: A New Frontier for Research in Acute Respiratory Distress Syndrome,Mahida RY, Matsumoto S, Matthay MA. American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology, 2020

19. Exosomes A clinical COmpendium - Methods for exosome isolation and characterization,Zhou M, Weber SR, Zhao Y, Chan H, Sundstrom JM. Exosomes A Clinical Compendium 2020

20. Phenotypic analysis of extracellular vesicles: a review on the applications of fluorescence,Panagopoulou MS, Wark AW, Birch DJS, Gregory CD. Journal of Extracellular Vesicles, 2020

21. Immune Cell-Derived Exosomes in the Cancer-Immunity Cycle Yan W, Jiang S, Trends in Cancer 2020

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